利用同源重组、基因组编辑等基因操作技术,通过对野生型大肠杆菌菌株的7个蛋白酶进行敲除,同时转入多个促蛋白折叠和二硫键形成的分子伴侣蛋白或酶,构建了能高效分泌表达复杂蛋白的大肠杆菌表达菌株,具有表达量高、蛋白折叠正确、生长速度快、菌体收获量大等优点;同时构建了一种新颖的表达载体,该载体具有菌体内拷贝数高,表达量高,独特的抗性,不用抗生素时质粒几乎无丢失等优点。 该菌株和载体完全不同于目前各制药企业使用的菌种和载体,无论是表达量和发酵水平远远高于目前市面上应用的商品化产品,目前已成功用于雷珠单抗、赛妥珠单抗、抗PD-1抗体Fab片段等复杂蛋白的表达。
构建了OCH1基因敲除的低糖基化毕赤酵母工程菌,可使表达蛋白的糖基不含有高甘露糖结构,仅保留少量的N乙酰葡萄糖基,理论上不再具有免疫原性。该低糖基化毕赤酵母工程菌可替代大肠杆菌用于复杂蛋白的表达。 利用该工程菌完成了低糖基化和突变型的无糖基化GLP1-Fc融合蛋白和罗米司亭的高效表达,同时进行了多个蛋白糖基化位点缺失突变体的表达。
构建了全人源噬菌体展示库,该库所有抗体全部为人源性抗体,作为一个抗体类药物研究的源头平台,可从该库中筛选针对各种抗原的全人源抗体。我们已从上述噬菌体展示库中筛选到多种抗体序列。
已按GMP标准建成了生物技术药物中试与质量研究平台,涵盖了原液与制剂(水针/冻干粉针)小试、中试工艺研究及生产和理化、仪器与微生物检验方法研究及分析等功能,为完成生物技术药物的临床前药学研究奠定了坚实的基础。